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    三葉青的研究進展
    發布者:浙江磐紫三葉青生物科技有限公司 發布時間:2016/11/1 閱讀:6086

    三葉青的研究進展

    江 華(從化市中醫院 廣東 從化 510900)

    【摘 要】本文從三葉青的生藥特征、本草考證、種質資源、化學成分、藥理作用、臨床應用 6 個方面對三葉青的研究進展進行了總結回顧,并對其應用和發展前景進行了展望。

     

    【關鍵詞】三葉青;化學成分;藥理作用;研究進展


        三葉青(Radix Tetrastigmue),又名金絲吊葫蘆、三葉崖爬藤等,系葡萄科崖爬藤屬植物三葉崖爬藤(Tetrastigma Hemsleganum Diels et.Gilg.)的干燥塊根。其在民間有“藥王”、“抗癌神草”、“黑金”等美譽,為常用中草藥,主要分布在長江以南各地[1-3]。近年來,三葉青的相關研究方興未艾。由于確切的抗癌作用被得到驗證,三葉青再次引起了醫藥界的廣泛關注。  

        本文從三葉青的生藥特征、本草考證、種質資源、化學成分、藥理作用、臨床應用 6 個方面對三葉青近二十年來的研究進展進行了綜述,并對其應用和發展前景進行了展望。

    1 生藥特征

    1.1 生物學性狀

        三葉青系多年生草質攀緣藤本, 長 3-6cm。塊根粗壯,呈紡錘形、橢圓形至卵圓形, 單個或數個相連呈串珠狀。莖細弱, 具縱棱,下部節上生根。卷須與葉對生, 有分枝。葉互生, 葉柄長 2-4m, 掌狀復葉, 小葉 3, 小葉柄長 3-5mm,小葉片狹橢圓形至狹卵狀橢圓形, 長 3-7cm, 寬 1.5-3cm。中央小葉較兩側者略大, 長 3-7cm,寬 1.3-2cm,短漸尖至漸尖, 基部漸狹, 兩側小葉基偏斜, 葉緣具刺狀疏齒, 兩面均無毛, 或僅在下面中脈上被毛。聚傘花序腋生, 花小, 黃綠色萼齒小, 卵形花瓣 4, 卵形, 開張,外面頂部有角狀突起;ūP明顯,與子

    房基部合生;雄蕊 4, 雌蕊 1;柱頭 4 裂星狀開展。漿果球形, 熟時紅色,子軟狀球形;ㄆ 5-8 月, 果期 8-10 月[1-3]。

    1.2 藥學性狀

        根呈紡錘形、軟圓形、葫蘆形或橢圓形,一般長 1.5-6cm,直徑 0.7-2.5cm。表面褐色,多數較光滑,或有皺紋和少數皮孔狀的小瘤狀突起,有時還有凹陷,其內殘留棕褐色細根。質硬而翠,斷面平坦而粗糙,類白色,粉性,可見棕色形成層環。氣無,味甘[1,3]。

    黃真[3]、趙永偉[4]等人比較了廣西三葉青和浙江三葉青的性狀差異。發現廣西三葉青個體較大,多數表面有皺紋, 斷面粉紅色, 水浸液粘性不足;而浙江三葉青個體較小, 較圓整, 光滑, 斷面類白色, 水浸液有明顯的粘性。

        三葉青塊根經常會與豆科植物土圞兒(Apios Fortunei Maxim)的塊根相混淆。與三葉青相比,土圞兒外表面呈土黃色,有的可見橫向突起的皮孔及地安裝須根痕;斷面呈黃白色,形成環和維管束不清楚。另外兩者在植物形態和纖維特征上還有很多差異,要注意鑒別[5]。

    1.3 顯微性狀

        三葉青的顯微性狀為:淀粉粒極多,多為單粒,形狀多樣;粘液細胞多,無色,類圓形或橢圓形;臍形狀多樣;纖維無色或淡黃色,單個或成束;草酸鈣針晶成束或散在。

        三葉青產地不同顯微性狀有差異。黃真[3]發現廣西三葉青皮層較寬, 可見維管束呈輻射狀排列,而浙江三葉青維管束排列成“><”形。趙永偉[4]發現廣西三葉青的韌皮部較寬厚,束間數個纖維群,而浙江三葉青韌皮部狹窄,束間有多個或數個纖維群;同時發現粉末呈淡灰棕色或淡粉紅色,草酸鈣簇晶少見。而黃成勇[6]報道粉末成黃綠色,草酸鈣簇晶較多。

    2 本草考證

        《本草綱目》記載,三葉青又名金絲吊葫蘆、三葉崖爬藤,是葡萄科多年生藤本植物。主要以塊根入藥,性涼、無毒、味甘微苦!吨参锩麑崍D考》記載“蛇附子(三葉青塊根)”云:“蛇附子產建昌。蔓生,莖如初生小竹,有節,一枝三葉,葉長有尖,圓齒疏紋。對葉生須,須就地生,根大如麥冬,俚醫以治小兒高熱、止腹痛、取漿沖服!薄顿F州草藥》載三葉青“散積、理氣、解毒、補脾”,用于治療小兒高熱、扁桃體炎、支氣管炎、肺炎、咽喉炎、肝炎、積病毒性腦膜炎、頸淋巴結核、月經不調及痛經等。在瑤族人中,三葉青又被稱為東破石珠,用于泌尿系統結石及膽、腎結石和胃痛等疾患[4,7]。

        在近現代中藥文獻《中藥大辭典》、《中華本草》、《全國中草藥匯編》等中也有記載[2],其別名有:石猴子、石抱子、石老鼠、攔山虎、雷膽子、破石珠、土經丸、搜夾風、三葉對、小扁藤、陰靈子、老鼠鳥、三葉扁藤、金絲吊葫蘆、絲線吊金鐘、金線吊葫蘆、金線吊馬鈴薯等。

    3 種質資源

        三葉青在浙江、江西、廣西、福建、臺灣、湖北、廣東、四川、貴州、云南等省區有分布[8],以前三者報道居多。其對生長環境的要求非常奇特,必須生長在海拔 700 米的深山密林和懸崖峭壁的被陰面,上面要有散射光,旁邊要由細水滲出,下面要有樹葉覆蓋,常年氣溫保持在 18℃左右。1 年只長 1 寸,7 年才能長成 7 只葫蘆[7]。

    長期以來,三葉青一直為野生品種。由于毫無節制的狂采濫挖,加上其對生長環境要求苛刻,目前三葉青已非常稀少,瀕臨滅絕。

        三葉青的組織培養和快速繁殖近年來也有研究報道,這為三葉青的種質保存和繁育提供了新的方法。鐘毓倩[9]通過對三葉青不同部位的外植體進行誘導,發現在相同消毒處理的情況下和同種培養基中,最佳誘導外植體為莖尖,MS+NAA0.2 為最佳組合的繼代增殖培養基。錢麗華[10]研究發現,適當濃度的6-BA (不宜超過 1.0mg/l)和合適的光照強度(25µmol·m-2·s-1)有利于三葉青腋芽的萌發;MS+6-BA2.0 mg/l+NAA0.2 mg/l 或 MS 外加單一激素 6-BA2.0 mg/l 可作為三葉青不定芽繼代培養較適宜的培養基配方。

    4 化學成分

      現代醫學研究證明,三葉青中的有效成分為β一谷甾醇、生物堿麥角茲醇、蒲公英萜醇、蒲公英萜酮、胡蘿卜苷、山奈酚、槲斗素、還原糖、氨基酸等。三葉青根中含槲皮素、山柰酚、山柰酚-3-O-新橙皮糖苷、β-谷甾醇、胡蘿卜苷及6’-O-苯甲;}卜苷[11,12]。其中槲皮素、山柰酚、山柰酚-3-O-新橙皮糖苷為黃酮類化合物。地上部分含蒲公英萜醇、蒲公英萜酮、β-谷甾醇及麥角甾醇[13]。葉中含有黃酮類,沒食子酸和花青素類[14]。劉東等[15]從三葉青中鑒定出3種黃酮類化合物,分別為5,7,4’一三羥基黃酮-6-α-L-吡喃鼠李糖-(l-4)-α-L-吡喃阿拉伯糖甙,5,7,4’-三羥基黃酮-8-α-L-吡喃鼠李糖-(1-4)-α-L-吡喃阿拉伯糖甙,5,7,4’-三羥基黃酮-6,8-2-C-β-D-吡喃葡萄糖甙。

        黃真[16]以三葉青總黃酮為指標,通過單因素考察和正交試驗相結合的方法,優選了三葉青種總黃酮的的提取工藝,結果表明乙醇濃度對三葉青總黃酮的提取影響較大,其次為提取次數、提取時間、乙醇用量。最佳提取工藝參數為:50%乙醇,15倍量,回流提取3次,每次2h。

        黃真[3]還通過通過理化鑒別浙江三葉青與廣西三葉青,發現兩者皆含黃酮類、多糖類及氨基酸類成分。

    5 藥理作用

        據報道,三葉青具有清熱解毒、祛風化痰、活血止痛、理氣健脾等作用[1]。近年來的研究表明,三葉青無毒,還有抗腫瘤、抗病毒、保護肝臟、抗炎鎮痛等作用。

    5.1 急性毒性

        資古明等[17]研究發現小鼠腹腔注射三葉青塊根提取物的 LD50 值為 450.8± 81.9g(生藥)/kg。江月仙等[18]將三葉青按《保健食品檢驗與評價技術規范》 (2003 年版)中“食品安全性毒理學評價試驗”進行實驗:第一階段大鼠經口急性毒性半數致死(LD50),雌雄兩性別均大于 100 kg/g 體重;小鼠經口急性毒性半數致死量(LD50 ),雌雄兩性別均大于 40.0g/kg 體重,按急性毒性分級標準判定,屬實際無毒;第二階段 Ames 試驗結果為陰性,小鼠骨髓細胞微核試驗和小鼠精子畸形試驗結果均為陰性,說明三葉青未顯示有致突變性。江月仙等19]還進行了長期毒理學研究,發現經過三葉青 30d 喂養的大鼠,未出現中毒癥狀,大體解剖及組織學觀察未見異常病變,對大鼠體重、進食量、食物利用率、血象、血生化均無明顯影響,說明三葉青長期服用是安全無毒的。鐘曉明[20]對三葉青的急性毒性試驗研究也表明,三葉青用于臨床是安全的。

    5.2 抗腫瘤作用

        楊大堅等[11]發現:三葉青提取物中乙酸乙酯溶部分的主要成分 6’-O-苯甲;}卜甙具有一定的腫瘤抑制作用。丁鋼強等[22]報道:三葉青提取物中乙酸乙酯溶部分對人肝癌細胞 HepG2 活性具有較強的抑制作用,正丁醇部分也有一定的作用。同時發現,對正常原代培養的大鼠肝細胞活性沒有明顯的影響,對乳酸脫氫酶活力影響也較對 HepG2 要小,提示三葉青的各部分提取物對正常細胞影響較腫瘤細胞要小,證實了三葉青提取物中乙酸乙酯溶部分的確具有很好的抑制腫瘤細胞作用。系列研究表明[21-25]:三葉青乙酸乙酯提取物對腫瘤細胞增值周期產生阻滯,能降低腫瘤細胞的生長速度,對腫瘤細胞增殖和端粒酶基因的表達具有顯著抑制作用,對腫瘤細胞有促凋亡作用,增進腫瘤細胞的死亡。此外,季紹勇[25]報道以三葉青為主要成分的金絲地甲膠囊,對抑制 LEWIS 肺腫瘤細胞,SMMC-7721 肝腫瘤細胞,HT-60 人淋巴母細胞性白血病細胞,SCG-7901 胃腫瘤細胞及 HCT-116 結腸腫瘤細胞生長的抑制有明顯效果。馮正權[26]報道三葉青黃酮具有抗腫瘤細胞增殖和誘導凋亡的作用。程偉[27]報道,三葉青提取物對肺癌 A549 有明顯的的體外抑制作用,其抑制作用與藥物的濃度和時間呈明顯正相關。汪珍[28]的研究表明,三葉青提取物具有對人結腸癌細胞系 RKO 細胞抗增殖和誘導凋亡的作用,且呈劑量依賴性。中國科學院上海藥物研究所證實[8],三葉青對 BEL-7402 人肝癌細胞、A-549 人肺癌細胞、SGL-7901 人胃癌細胞生長的抑制率分別為 100%、96.4%、89.6%.

    6 前景展望

        三葉青是我國特有植物,含有黃酮類、三萜類化合物及蒲公英萜醇等,為用途廣泛的珍稀名貴中藥材。尤其是近年來對其抗惡性腫瘤等重大作用的研究發現,使得三葉青熱潮正式掀起。目前對三葉青的深入研究,國內剛開始,國外尚未啟動。隨著對三葉青的深入認識,以及對三葉青的濫采亂挖,野生三葉青越來越稀少,深入研究其人工栽培技術并保存三葉青種質資源,保護和擴大三葉青藥源顯得尤為迫切。另外對三葉青的研究多數集中在其塊根,對其莖葉尚無系統研究。三葉青無毒,若發展為藥食兩用植物(如其葉可開發為保健葉片茶等)將對全面利用其有限資源,充分發揮其神奇功效大有裨益。隨著現代科學技術的飛速發展,尤其是醫藥科學的日新月異,相信三葉青的藥理作用和相關產品定會被深入挖掘和開發,給更多的人帶去福音。

     

    參考文獻:

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    作者簡介:

    江華,男,漢族,1975 年 8 月出生,籍貫:廣東省從化市,工作單位:從化市中心醫院,學士學位,學歷:廣州中醫藥大學大學本科 1998 年畢業,主治醫師,現在從事中西醫結合兒科工作。

     

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